产品货号:
MT0107
中文名称:
核酸外切酶III
英文名称:
Exonuclease III
产品规格:
5KU
发货周期:
1~3天
产品价格:
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本制品来源于E.coli,具有3′-5′外切酶活性,它作用于双链DNA,从3′ OH末端方向逐步切去单核苷酸;每次酶与底物结合催化,只有几个核苷酸被除掉,从而在DNA分子群内产生渐进缺失。该酶的最佳底物为平末端、5′突出末端双链DNA分子,但也可作用于双链DNA的缺刻处,从3′降解DNA分子,释放5′单核苷酸。对于3′突出末端,尤其是多于4nt的几乎完全不切割,亦不能切割硫代磷酰脂键。核酸外切酶III的活性部分依赖螺旋结构,并根据序列的不同而有差异(C>A=T>G)。另外,核酸外切酶III还具有脱嘌呤/嘧啶-核酸内切酶活性、RNaseH活性和3′磷酸酶活性。
保存:-20℃,有效期3年。
50μL反应体系中,37℃条件下,30分钟催化E.coli DNA产生1nmol酸可溶性产物所需要的量定义为一个活性单位。
1×Exonuclease III Buffer:
10mM Bis-Tris(pH7.0),10mM MgCl2,1mM DTT。
50mM Tris-HCl(pH8.0),50mM KCl,1mM DTT,50% Glycerol。
70℃加热20分钟。
图1.分别用不同的内切酶切质粒DNA产生5'突出末端、平末端和3'突出末端产物,然后用Exonuclease III(2.5U)分别酶切这三种产物(5μg),将酶切产物琼脂糖电泳。
泳道1:5'突出末端产物;
泳道2:平末端产物;
泳道3:3'突出末端产物;
M:DNA Marker 10000(MT0039)。
图2.EcoR V酶切pUC57质粒获得酶切产物,然后分别用不同量的Exonuclease III酶切该产物获得渐进缺失产物。
泳道1:对照(不加Exonuclease III);
泳道2:0.312U Exonuclease III;
泳道3:0.625U Exonuclease III;
泳道4:1.25U Exonuclease III;
泳道5:2.5U Exonuclease III;
M:DNA Marker 10000(MT0039)。
相关搜索:核酸外切酶III,Exonuclease III
组分 | 2500U | 25000U |
Exonuclease III(100U/μL) | 25μL | 250μL |
10×Exonuclease III Buffer | 1mL | 1mL |
保存:-20℃,有效期3年。
- 非定向巢式缺失;
- 定点突变;
- 链特异性探针的制备;
- 制备用于双脱氧测序的单链底模板。
50μL反应体系中,37℃条件下,30分钟催化E.coli DNA产生1nmol酸可溶性产物所需要的量定义为一个活性单位。
1×Exonuclease III Buffer:
10mM Bis-Tris(pH7.0),10mM MgCl2,1mM DTT。
50mM Tris-HCl(pH8.0),50mM KCl,1mM DTT,50% Glycerol。
70℃加热20分钟。
图1.分别用不同的内切酶切质粒DNA产生5'突出末端、平末端和3'突出末端产物,然后用Exonuclease III(2.5U)分别酶切这三种产物(5μg),将酶切产物琼脂糖电泳。
泳道1:5'突出末端产物;
泳道2:平末端产物;
泳道3:3'突出末端产物;
M:DNA Marker 10000(MT0039)。
图2.EcoR V酶切pUC57质粒获得酶切产物,然后分别用不同量的Exonuclease III酶切该产物获得渐进缺失产物。
泳道1:对照(不加Exonuclease III);
泳道2:0.312U Exonuclease III;
泳道3:0.625U Exonuclease III;
泳道4:1.25U Exonuclease III;
泳道5:2.5U Exonuclease III;
M:DNA Marker 10000(MT0039)。
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